TINCIÓN DE GIEMSA.(Práctica 9 )6 / 11/ 2014

Material :
2portas bien limpios.
Microscopio .
Cristalizador .

Puente de tinción.
3 pipetas Pasteur
2 tubos de ensayo.
Un cubre.
Bata.
Guantes .
Papel de filtro liso.

Reactivos :

Solución colorante de Giemsa  y tampón
  pH 7,2 de Panreac.
Metanol.
Aceite de inmersión.

Muestra:

Sangre venosa anticoagulada(EDTA)

Técnica:
1º Hago un frotis sanguineo y dejamos secar según la tecnica.
2º Pongo el frotis sobre el puente de tinción  y en posición horizontal.
3º Cubro el frotis con metanol durante tres minutos .Eccurro y lo dejo secar al aire,así se fija el frotis.
4º a continuación pongo el porta sobre el puente de tinción y le añado con ayuda de la pipeta el colorante de Giemsa y tampón de ph 7,2 de Panreac y lo dejo actuar 25 minutos .
5º Pasado el tiempo escurrimos y lavamos el cubre con agua del grifo.Seguidamente lavamos con tampón ph 7,2 hasta eliminar los retos de colorante.
6º Dejo escurrir y que se seque en posición vertical.
7º Una vez seca la tinción le pongo el cubre y le pongo una gota de aceite de inmersión.

Resultado :

Los hematies se tiñen de rosa y los neutrófilos con su núcleo color azul violeta.

Hoja de trabajo :

1º¿Cuáles son los anticuagulantes más adecuados para esta técnica ?
Sangre capilar fresca o venosa anticoagulada con EDTA:
2º ¿Con qué reactivo fijamos el frotis ?Metanol.
3º ¿Cuánto tiempo debe actuar el colorante en el frotis ? 25 minutos.