PREPARACIÓN DE LA GOTA GRUESA(PRACTICA 8)

Material :
Un tubo de  sangre venosa anticoagulada.
Una pipeta Pasteur.
2 portas
2 cubetas de tinción (una con Giemsa al 3 % y otra cubeta con agua limpia )

Reactivos:

• Metanol.
• Solución colorante Giemsa al 3 %.
• Un vaso de precipitados .
• Un puente de tinción.

Técnica :

1º Colocar una gota de sangre en el porta y con el otro porta realizar una extensión y la dejamos secar.

2º En el otro extremo al lado de la extension echo tres gotas de sangre en forma de un pequeño triangulo con el vertice de este  mirando hacia el frotis y seguidamente con la ayuda de un porta por un extremo hacemos sobre las tres gotas movimientos circulares,(unos 6 movimientos) sobre ellas para lograr la desfibrinación  de la sangre.

3º Coloco el porta sobre el puente de tinción y le añado al frotis  tres gotas de metanol  para fijarlo solamente a el,  la gota gruesa no  y lo dejo unos segundos.

4º La gota gruesa se deja secar unas 24 horas  en posición horizontal y protegemos la muestra de moscas ,polvo y de calor excesivo.

5º Pasado ese tiempo ,introducimos la muestra el la cubeta de giemsa ,durante 30 a 45 minutos y protegida en ese tiempo de la luz solar.

6º Sacamos el porta de esta solución de Giemsa y la pasamos a la cubeta de agua limpia unos segundos .

7º Extraigo el porta y lo dejo secar en posición vertical.

Fundamento :

Para el estudio de parásitos del género Plasmodium hay cuatro especies que se encuentran en su fase inicial en algunas de sus etapas  en la sangre periférica y para ello se hace una extensión fina y otra gruesa en el mismo porta .

Hay que prestar atención en los hematies infectados y los parásitos que pueden haber dentro de ellos.

El paludismo se basa en el aspecto de los parasitos que pueden ser :como motas rosas o rojas en el interior de los eritrocitos (Plasmodiun Vivax y ovale );en forma de anillo ,en forma de ameboideas;conglomerados de merozoitos y gametocitos libres en plasma.

Resultados :

El recuento de los parásitos se hace con cruces y en campos de 100.






Hoja de trabajo :
1º ¿Qué colorante se utiliza para teñir la preparación de gota gruesa ?
Giemsa al 3 %
2º ¿Cómo están los hematíes en la preparación de gota gruesa ?
Están alisados.
3º ¿Con qué sustancia se fija la preparación de gota gruesa ?
Metanol.

Resultados obtenido :La muestra se ve oscura y por lo tanto no se puede apreciar nada.
Valoración de los resultados :La extensión debe ser considerada como :
No válida.