DETERMINACIÓN FUNCIONAL DE FIBRINÓGENO (PRÁCTICA XLII)

0 9 /03 /15
FUNDAMENTO :
Según el método de von Clauss ,se basa en en medir el tiempo que tarda un exceso de trombina en degradar a fibrina el fribrinógeno presente en un PPP diluido y en formar el coagulo.
El tiempo que tarda en formarse el coágulo de fibrina depende,de la cantidad inicial de fibrinógeno y es inversamente proporcional a la concentración de esté en el plasma estudiado (fibrinogenemia ).

• MATERIAL :
• Una gradilla.
• 6 tubos de ensayo de plástico. 
• Una prepipeta de seguridad.
• Una pipeta graduada de vidrio de 1 ml , de 5 ml y de 2ml.
• Una pipeta autómatica de 100ul y de 200ml.
• Puntas de pipeta (amarillas ).
• Un rotulador.
• 6 cubetas de coagulómetro.
• Un coagulómetro.
• 6 trocitos de acero para depositar en las cubetas.
• Un bolígrafo .
• Una hoja de papel de tipo logarítmico.
• Bata,guantes ,papel de filtro.

REACTIVOS:

Un kit de fibrinogeno :

-  R 1: es trombina bovina .

- R 2 : es tampón imidazol
-R 3 :solución caolín.

-Control normal coagulation.

MUESTRA:

Plasma pobre en plaquetas (PPP).

TÉCNICA:

1º. Preparo el siguiente cuadro :

                                Tubo: 1        2          3        4         5          6

Dilución del calibrador      1/40     1/30     1/20     1/10    1/5      1/10       

Muestra PPP (ul)                  0         0        0        0         0          50

Tampón imidazol (ml)       3,9      2,9     1,9       0,9    0 ,4      (450 ul)


Control normal (ul)           100      100     100     100    100          0
coagulation

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Despues cojo 6 cubetas de coagulómetro y las rotulo:              1      2       3          4        5       6.
                                                                                       _______________________________
                                           Solución anterior (ul) :             200   200    200     200    200    200
                                                      R 3(ul ) :                       20    20      20       20     20      20       

2º Deposito las cubetas en el coagulometro le añado un trocito de metal a cada una y las dejo atemperar 5 minutos.

3º Pongo la cubeta en la celda de medida ,le coloco el tapóm rojo y le añado 100ul de R1 (el R1 NO SE ATEMPERA )

4º Anoto las medidas :  las medidas no han salido bien

LECTURA DE LOS RESULTADOS .

Si el resultado final es mayor de 40 segundos,la fibrinogenemia es muy baja,se repite la determinación pero a una dilución de 1/5 (100 ul de muestra y 400 ul de tampón veronal ) y el resultado dividirlo por 2.

Despues para trazar la fibrinogenemia se traza una curva  de calibración o de referencia,en vertical los segundos y en horizontal  las concentraciones de fibrinógeno y se dibuja la resta.

La fibrinogenemia normal : 150 y 450 segundos.

INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS :

La concentración de fibrinogeno puede estar disminuida en trastornos congenitos (afibrinogenemia congénita) o adquiridos(hepatopatías ).

Y asciende en en multitud de procesos inflamatorios.

HOJA DE TRABAJO :

1º ¿De qué tipo es la determinación de fibrinógeno realizada en esta práctica?

2º ¿A qué concentración está la trombina bovina ? 100%

3 º ¿A qué dilución se somete a la muestra ? 1 /10

4º ¿Cuál es la fibrinogenemia normal ?  entre 150 -450 segundos.

 GRÁFICA :