cuaderno de practicas de laboratorio: RECUENTO DE PLAQUETAS CON HEMOCITÓMETRO(PRÁCTICAXXXV) 12 /1/15

MATERIAL:

Un tubo de ensayo.
Microscopio.
Bata.
Guantes
Papel de filtro.
Tijeras.
Gasas.
Una cámara de recuento Neubabuer mejorada.
Una pipeta de Thoma,para glóbulos rojos.
Un tubo de goma con boquilla.
Un cubre.
Una placa Petri.
una gradilla.

REACTIVOS:

Agua destilada.
Liquido de dilución.Laboratorios Spinreact(en el frigorífico). Este liquido rompe los hematíes,evita que se agreguen las plaquetas entre si y su adhesión a otros elementos ,facilita la visión de las plaquetas se ven refrigentes.

MUESTRA :

Sangre venosa reciente con EDTA- K3.

TÉCNICA :

1º Ponemos liquido de Spinreact en el tubo de ensayo (1 ml para cada determinación ).

2º Con la pipeta de Thoma aspiro la sangre homogeinizada hasta la señal de 1.

3º Limpio la sangre sobrante adherida al exterior de la pipeta.

4º Aspiro del liquido de dilución hasta la señal 101 de la pipeta.

5º Agito la pipeta con suaves movimientos durante 5 minutos.

6ºDesecho la 5 primeras gotas de dilución que salen de la pipeta.

7º Cargo la cámara de recuento,con la dilución que queda en la pipeta.

8ºPongo la cámara de recuento dentro de una cámara Petri, que ya la tengo preparada está con un papel de filtro húmedo .

9º Dejo reposar la cámara de recuento durante 15 minutos,para que sedimente las plaquetas.

10º Pongo la cámara de recuento sobre el microscopio,enfocando uno de los reticulos de la cámara ,con el objetivo de 10 x.

11º Enfocar uno de los cuadrados grandes (a 40x )poniendo el condensador bajo.

12º Cuento las plaquetas que hay en ese cuadro grande.

LECTURA DE RESULTADOS :

Los trombocitos se ven con corpúsculos redondeados y ovalados,de pequeño tamaño y muy refringentes.
Para calcular el nº de plaquetas por mm3 de sangre ,aplico la fórmula :

PTL/mm3=P x V x D = P x 1000

P=Nº de plaquetas por mm3 de sangre.
V= Corrección de volumen(10 )
D= Corrección de dilución(100)

PTL/mm3 = 23 x 10 x 100 = 23 x 1000= 23000 plaquetas /mm3

Si la cifra obtenida es muy reducida,se efectua una dilución menor de la muestra y se cuentan los trombocitos de varios cuadros grandes.
Y si es mayor la cifra ,se efectua una dilución mayor de la muestra.
Esto quiere decir que hay que confirmar un ajuste de los cálculos.

HOJA DE TRABAJO:
1º ¿Qué tipo de pipeta diluidora se utiliza en el recuento de plaquetas ?De Thoma ,para glóbulos rojos.
2º ¿Qué funciones desempeña el liquido de dilución empleado ?Rompe los hematíes,evita la agregación de las plaquetas entre si y su adhesión a otros elementos y facilita la visión al hacerlas refringentes.
3º ¿Cuánto líquido de dilución se necesita para efectuar un ensayo ? 1ml.
4º ¿Con qué se puede preparar una cámara de húmeda ?Con una cámara Petri cerrada.
5º ¿Con qué objetivo se cuentan las plaquetas ?40 x
6º ¿Cómo se aprecian los trombocitos de este recuento ? Como corpúsculos redondeados y ovalados,de muy pequeño tamaño y muy refringentes.