sábado, 17 de enero de 2015

DETECCIÓN DE CRIOGLOBULINAS 12 /1/ 15 (PRÁCTICA XXXIII)

INTRODUCCIÓN :
Las grioglobulinas son inmunoglobulinas aisladas o complejos inmunes que están alterados.Está alteración hace que se vuelvan insolubles y precipiten en el suero cuando están a una temperatura inferior a la del cuerpo (37 º).
Antes o después de la precipitación  se puede fijar un componente a la crioglobulina .
Hay 3 clases :

  • Crioglobulinas tipo I : Es una inmunoglobulina monoclonal (IgG )(paraproiteína).Se encuentra en el suero a una alta concentración (>5 mg/ml ).
  • Crioglobulinas de tipo II :inmunoglobulina monoclonal (IgM) y otra policlonal (IgG) que funciona como antígeno (Ag).Se encuentra en el suero a una concentración mediana (1-5 mg/ml).
  • Crioglobulinas tipo III : son las más frecuentes están formadas por dos inmunoglobulinas policlónicas (IgG y IgM ).Su concentración es muy baja (<80 ug/ml).
FUNDAMENTO :
Detectar crioglobulinas en el suero (a 4º C se precipitan más ) y el precipitado adopta la forma de partículas blanquecinas .

MATERIAL :




  • Una pipeta Pasteur.
  • Papel con parafilm.
  • 2 tubos de ensayo.
  • Gradilla .
  • Centrifuga de microhematocrito.
  • 2 capilares sin heparina (azul).
  • Una nevera .
  • Un baño de agua .
  • Plastilina.
  • Centrifuga de tubos de ensayo.
  • Una regla o un lector de microhematocrito.
MUESTRA :

Sangre venosa ( tapón de color rojo,que ya lleva gel separador del coagulo).Se centrifuga a a 3500 r.p.m. por 15 minutos.Se saca el suero transparente a temperatura ambiente por que si se hace en un ambiente frío se formaría crioglobulinas.

TÉCNICA.

1º.  Colocar el tubo de suero en la nevera, entre 4 y 6ºC.

2º.  Mirar el tubo a los 30 minutos y después cada día, durante 6 días.

LECTURA DE LOS RESULTADOS:

Si aparecen partículas blanquecinas en el suero debe ser incubado a 37º C en el baño de agua 5 minutos .
Si no desaparecen las partículas es por que tiene restos de fibrina.
Cuando desaparecen la prueba da positivo tiene crioglobulinas.
El grado de positividad: 

Discretamente turbio                +
Turbio                                     ++
Lechoso                                 +++

Si ha salido positivo,se hace la determinacion de criocrito.
Se hace de la siguiente manera:

1ºLleno 2 capilares sin heparina las 3/4 partes de suero.
2º Sello con plastilina los capilares y enfriar los capilares 4-6ºC, para que se produzca la precipitacion máxima.
3º Centrifugar los capilares 12.000 r.p.m  durante 5 minutos.
4º Calcular el porcentaje con una regla o un lector de microhematocrito.

INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS:

Si es una crioglobulimenia tipo I ( miolema múltiple,...)
Si es de tipo II puede ser ideopaticas (trastornos proliferativos,...)
Si es de tipo III con infecciones sistematicas y autoinmunes(glomerulofrenitis,...)
Las manifestaciones:

  • Aumento de la viscosidad de la sangre.
  • Precipitación de las crioglobulinas.
  • Deposito de inmunocomplejos.
1.¿A qué temperatura debe debe someter el suero en una detección de crioglobulinas?a 4ºC
2. Si el precipitado no se reabsorbe con calor, ¿ de qué sustancia está formado?partículas blanquecinas.
3. ¿Cuántas cruces se le asigna a un suero que adquiere un aspecto lechoso?+ + +
4. ¿A qué concentración sérica suelen encontrarse las crioglobulinas tipo I?> de 5mg/ml
5. ¿ Qué manifestaciones clínicas puede producir una crioglobulinemia?Aumento  de la viscosidad,precipitación de las crioglobulinas y depósito de inmunocomplejos.


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