CALCULO DE ÍNDICES ERITROCITARIOS 26 /01 /15

RECUENTO DE HEMATÍES (RBC):
He cogido una muestra de 0,5ml de sangre de la bolsa y la he puesto en un tubo de ensayo y le he añadido una dilución 1 /100 de reactivo de Hayem,la mezclo con la micropipeta y la pongo sobre la cámara de Neubabuer durante unos minutos para que las células sedimenten.
Y lo enfoco en el microscopio con el objetivo de 40 x y  el condensador a baja altura.
Cuento cuatro cuadros del cuadro central los de las cuatro esquinas y el del centro.
 Y me da las siguientes cantidades : 110 + 94+ 81+87+88 =460
RBC= H x 5 x10 x D
RBC: 460 x 5 x 10 x 100 = 2300000 hematíes /mm3
H = Hematíes contados en5 cuadros medianos.
D= Factor de dilución.
RESULTADO :
El resultado es bajo porque la sangre es de bolsa y se hace con sangre fresca .Por que lo normal está entre 4 y 5,5 mill./mm3 en mujeres y 4,5 y 6 mill./mm3 en los varones.

DETERMINACIÓN DE HEMATOCRITO

Los resultados de microhematocrito.
Del capilar 1 : 18 mm
Del capilar 2 : 19 mm
Resultado con la regla :

HTC= E x 100 /T
T= Plasma +eritrocitos
E= Eritrocitos
P= Plasma

HCT 1 =10 x 100/54 =18,51 %
HCT 2= 11 x 100 / 55 = 20 %

CONCENTRACIÓN DE HEMOGLOBINA :

Método micro :
Reactivos :Brabkin(RT) y calibrador (hemoglobin Cal )
Muestra :sangre de bolsa de dos muestras problema.
En cuatro tubos de ensayo  que tengo rotulados : Blanco ,Patrón  muestra 1 y muestra 2,pongo 2.5 de RT en cada uno.
En el tubo de Patrón pongo Calibrador 10 microlitros.
y en tubo de muestra1 le pongo sangre problema 1 otros 10 microlitros y en el de muestra dos ,sangre de problema dos otros 10 microlitros.Dejo incubar 3 minutos y analizo en el espectrofotómetro.
 RESULTADOS DEL ESPECTROFOTÓMETRO :
PATRÓN : 0,200
MUESTRA 1 : 0,256
MUESTRA 2 : 0,124

0,256/ 0,200 x 15 =19,2 g/dL
0,124 /0,200 x 15 = 9,3 g /dL
VALORES DE REFERENCIA :
Hombres 14-18 g/dL
Mujeres 12-16 g/ dL

Como las muestras son de sangre de bolsa los valores no están dentro de la normalidad.

CALCULOS:
HTC=20%
Hb = 19,2 g/dl
RBC =2,3 mill:/mm3

1º Calculo del volumen corpuscular medio (VCM ):

VCM=HTC/RBC  .  10

VCM= 20/2,3 . 10 = 86;95 fl

Valores normales :80-100 fl
-Menor microcitosis y si es mayor macrocitosis.

2º Concentración corpuscular media de hemoglobina(HCM) :
HCM=Hb/RBC . 10
HCM=19,2 /2,3  . 10 =83,47/ pg

-Tiene hipercromía relativa .
-Valores normales : 27-31 pico gramos.
-Si es menor de 27 es hipercromía  y si es mayor de 31 hipercromia relativa.

3º Concentración hemoglobínica corpuscular media (CHCM) :
CHCM=Hb /HCT . 100
CHCM= 19,2/20  .100 = 96 g/dl
-Valores normales :
32-36 g/dl
-La disminución es hidrocitosis y si es aumentado hipercromía absoluta.

TÉCNICA DE LA CIANMETAHEMOGLOBINA 19 / 1 / 15

FUNDAMENTO :

Para saber la concentración de hemoglobina en sangre para poder diagnosticar anemias.Consiste en transformar la hemoglobina en cianmetahemoglobina(con el cianuro y la metahemoglobina)esta se puede medir su absorvancia en el espectrofotómetro empleando un patrón conocido.

MATERIAL :

• 5 Tubos de hemólisis.
• Espectrofotómetro.
• Bata .
• Guantes.
• Pipeta graduada de 5 ml.
• Gradilla.
• Micropipeta.

REACTIVOS :

Drabkin (lo tenemos preparado con anterioridad ).

Hemoglobin  Cal

MUESTRA:

Sangre venosa con heparina  de dos bolsas diferentes : sangre problema 1 y sangre problema 2.

DESARROLLO Y TÉCNICA :

1º Preparo el método MICRO.

Rotulo cuatro tubos de ensayo: el 1º  Blanco ,2 º Patrón,3º  muestra 1 y 4º muestra 2.Los coloco en la gradilla y le añado :

1º RT (Drabkin ) 2,5 ml a todos los tubos mencionados anteriormente .2º Calibrador (Hemoglobin Cal )solo al tubo de Patrón unos 10 uL. 3º  Al tubo que pone muestra1 le añado 10 uL de sangre problema uno y 4º le añado 10 uL de sangre problema 2.

2º Incubo la muestra a temperatura ambiente 3 minutos ajusto el espectrofotómetro y leo la absorbancia en el espectrofotómetro.

CALCULOS :

Muestra /Patrón x 15 (conc.Patrón ) = g/dL

0,221 / 0,136 x 15 = 12,68 g /dL

VALORES DE REFERENCIA :

Hombres 14-18 g /dL

Mujeres 12-16 g /dL

RESULTADO :

Dentro de la normalidad en una mujer.

------------------------------------------------------------------------------------------------------------

OTRA FORMA DE HACERLO:

Con patrones :

1º Patrón (15 g/dl ) = 0,136 A(absorbancia )

2º 1/2 patrón (7,5 g/dl) = 0,069 A

3º 1/4 patrón (3,75 g/dl) = 0,056 A

Sangre problema 1 = 0,177

Sangre problema 2 = 0,114 

Con estos datos hago la gráfica .

GRÁFICA :      y = 0,177 (Absorbancia )

0,177 = 0,0074 x + 0,0225

0,177-0,0225= 0,0074 x

0,154 =0,0074 x

x= 0,154/0,0074 =  20,810

X = 20,810 g/dl  (Concentración )

---------------------------------------------------

y  = 0,114     (Absorbancia )

0,114 =0,0074 x + 0,0225

0,091 = 0,0074 x 

x = 0,091 /0,0074 = 12,297 g /dl    (Concentración )

DETERMINACIÓN DE HIERRO SÉRICO EN SANGRE 21/1 /15

OBJETIVO :
Para saber la cantidad de hierro que hay en la sangre.

 

MATERIAL:

• Espectrofotómetro.
• Pipeta de 5 ml 
• 4 tubos de hemólisis .
• Micropipeta 0,2 ml (punta amarilla ).
• Vaso de precipitados.
• Gradilla.
• Papel de filtro.
• Guantes.
• Rotulador permanente.
• Baño de agua.

REACTIVOS :

RT (mezcla de R1 (Tampón ) y R2( Reductor ) ).

R3 (Color ).

Agua destilada.

IRON CAL (Patrón).

MUESTRA :

Sangre venosa heparizada (bolsa ).

TÉCNICA Y DESARROLLO :

1º Cojo 4 tubos de hemólisis  y los rotulo: 1 (Blanco RT) ,2 (Patrón ) ,3( Blanco muestra) y 4 (Muestra ) y los coloco sobre la gradilla.

2º Echo RT en todos los tubos  1 ml con la pipeta .

3º Echo una gota de R3  a todos menos al Blanco muestra.

4º Echo 0,2 ml con la micropipeta (punta amarilla ) de agua destilada en el tubo de Blanco RT.

5º Echo 0,2 ml con la micropipeta de IRON CAL solo al tubo Patrón.

6º Y echo otro 0,2ml de sangre solo al tubo de la muestra.

7º Incubo la muestra 5 minutos a 37 ºC (yo lo he dejado a temperatura ambiente durante 10 minutos ).Despues lo agito con el agitador electrico y a continuación :

8º Leo las absorbancias de los tubos en el espectrofotómetro :

Tubo 1 Blanco RT : Solo para calibrar  ,se mete y se pulsa PUMB.

Tubo 2 Patrón : 0,144

Tubo 3 Blanco muestra : 1,590 

Tubo 4 Muestra : 1,595

El color es estable 30 minutos mínimo.

CALCULOS :

  Muestra - Blanco de la muestra / Patrón . 100(Conc.Patrón)= ug/dL de hierro.

1,595 -1,590 /0,144 . 100 = 3,47 ug/dL de hierro en sangre.

RESULTADO :

No es correcto por que he utilizado sangre de bolsa y no es la apropiada ya que tiene que ser sangre fresca sin hemolizar.

DETERMINACIÓN DEL VALOR HEMATOCRITO MEDIANTE EL MICROMÉTODO ( PRACTICA XIV)

21/11/2014.
OBJETIVO :Al centrifugar la sangre os hematíes ,se van al fondo del tubo ,y el plasma queda en forma de sobrenadante.
MATERIAL :
Guantes .
Bata
2 Tubos heparizados (con la franja roja )
Papel de filtro liso.
Gasa.
Una centrifuga de microhematocrito.
Plastilina .
Un tubo de ensayo.
REACTIVOS:
Sangre venosa anticoagulada con(EDTA)

TÉCNICA Y FUNDAMENTO :
1ºCojo los dos capilares y los lleno las 3/4 partes de longitud de sangre cada unoobteniendola  por capilaridad ,introducciendo los capilares en el tubo de ensayo.
2ºLos limpio con una gasa los capilares y los sello sus extremos con plastilina haciendolo penetrar en la plastilina.
3º Llevo los capilares a la centrifuga y los pongo equilibrados dentro de la centriguga ,el lado de la plastilina hacia el extremo exterior y debidamente encajados en sus correspondientes  ranuras.
4º Centrifugo los capilares a unas 12000 r.p .m durante 5 minutos.
5º Y los extraigo pasado el tiempo para su lectura .

LECTURA:

Puede hacerse de dos formas :

1ª)Con una regla milimetrada,midiendo las dos columnas del capilar y calculando el porcentaje de la columna de los eritrocitos ,mediante una regla de tres ,que sería así :
HCT= Recuento de hematíes.
E= Eritrocitos.
P= plasma.

T= (Plasma + eritrocitos ).

La formula :
HCT= E x 100 /T
 Tengo el capilar y me da estas medidas con la regla:
E= 27 mm
P= 23mm

T= (27 +23)= 50mm

HCT= 27 .100/50
HCT = 54 mm

2ª) Con un lector de microhematocrito

Se coloca el capilar en la ranura ,con la columna de eritrocitos  mirando hacia el punto rojo.

Y después se gira el disco central hasta hacer coincidir el angulo con la columna de plasma y eritrocitos .
Y se termina leyendo el resultado en la escala inferior ,dando el valor del hematocrito.

Entre los valores obtenidos de los dos capilares no de haber una direferencia superior al 2 % si no habria que repetir la determinación y si es menor ,se da como buena ,la media de ambos valores.

Y si el valor final de HCT es superior a 50 ,se repite la determinación ,pero alargando la centrifugación a 10 minutos.

RESULTADOS:


EL HCT normal en las mujeres es de 42 y 47 % y el de los hombres 45y 52 %.

Un valor bajo suele ser signo de anemia ,mientras un valor alto suele ser signo de una poliglobulina.


HOJA DE TRABAJO :
1º¿ Qué significa la franja roja que tienen algunos capilares de microhematocrito ? que contiene heparina en su interior.
2º¿A qué fuerza relativa de centrifugación (g) se centrifuga la sangre ? De 12000g  a 15000 g
3º Si la medida de la columna de eritrocitos es de 20mm y la columna de total es de 50mm ¿cuál es el valor del hematorito ? Hematocrito = 20mm .100/50mm
Hematocrito = 40 mm
4º Si con un capilar se obtiene un HCT de 45 y con el otro de 43.¿cómo debe ser la forma de actuar ante estos resultados ?Se da como buena la media de ambos valores.

DETECCIÓN DE CRIOGLOBULINAS 12 /1/ 15 (PRÁCTICA XXXIII)

INTRODUCCIÓN :
Las grioglobulinas son inmunoglobulinas aisladas o complejos inmunes que están alterados.Está alteración hace que se vuelvan insolubles y precipiten en el suero cuando están a una temperatura inferior a la del cuerpo (37 º).
Antes o después de la precipitación  se puede fijar un componente a la crioglobulina .
Hay 3 clases :

• Crioglobulinas tipo I : Es una inmunoglobulina monoclonal (IgG )(paraproiteína).Se encuentra en el suero a una alta concentración (>5 mg/ml ).
• Crioglobulinas de tipo II :inmunoglobulina monoclonal (IgM) y otra policlonal (IgG) que funciona como antígeno (Ag).Se encuentra en el suero a una concentración mediana (1-5 mg/ml).
• Crioglobulinas tipo III : son las más frecuentes están formadas por dos inmunoglobulinas policlónicas (IgG y IgM ).Su concentración es muy baja (<80 ug/ml).

FUNDAMENTO :

Detectar crioglobulinas en el suero (a 4º C se precipitan más ) y el precipitado adopta la forma de partículas blanquecinas .

MATERIAL :

• Una pipeta Pasteur.
• Papel con parafilm.
• 2 tubos de ensayo.
• Gradilla .
• Centrifuga de microhematocrito.
• 2 capilares sin heparina (azul).
• Una nevera .
• Un baño de agua .
• Plastilina.
• Centrifuga de tubos de ensayo.
• Una regla o un lector de microhematocrito.

MUESTRA :

Sangre venosa ( tapón de color rojo,que ya lleva gel separador del coagulo).Se centrifuga a a 3500 r.p.m. por 15 minutos.Se saca el suero transparente a temperatura ambiente por que si se hace en un ambiente frío se formaría crioglobulinas.

TÉCNICA.

1º.  Colocar el tubo de suero en la nevera, entre 4 y 6ºC.

2º.  Mirar el tubo a los 30 minutos y después cada día, durante 6 días.

LECTURA DE LOS RESULTADOS:

Si aparecen partículas blanquecinas en el suero debe ser incubado a 37º C en el baño de agua 5 minutos .

Si no desaparecen las partículas es por que tiene restos de fibrina.

Cuando desaparecen la prueba da positivo tiene crioglobulinas.

El grado de positividad: 

Discretamente turbio                +

Turbio                                     ++

Lechoso                                 +++

Si ha salido positivo,se hace la determinacion de criocrito.

Se hace de la siguiente manera:

1ºLleno 2 capilares sin heparina las 3/4 partes de suero.

2º Sello con plastilina los capilares y enfriar los capilares 4-6ºC, para que se produzca la precipitacion máxima.

3º Centrifugar los capilares 12.000 r.p.m  durante 5 minutos.

4º Calcular el porcentaje con una regla o un lector de microhematocrito.

INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS:

Si es una crioglobulimenia tipo I ( miolema múltiple,...)

Si es de tipo II puede ser ideopaticas (trastornos proliferativos,...)

Si es de tipo III con infecciones sistematicas y autoinmunes(glomerulofrenitis,...)

Las manifestaciones:

• Aumento de la viscosidad de la sangre.
• Precipitación de las crioglobulinas.
• Deposito de inmunocomplejos.

1.¿A qué temperatura debe debe someter el suero en una detección de crioglobulinas?a 4ºC

2. Si el precipitado no se reabsorbe con calor, ¿ de qué sustancia está formado?partículas blanquecinas.

3. ¿Cuántas cruces se le asigna a un suero que adquiere un aspecto lechoso?+ + +

4. ¿A qué concentración sérica suelen encontrarse las crioglobulinas tipo I?> de 5mg/ml

5. ¿ Qué manifestaciones clínicas puede producir una crioglobulinemia?Aumento  de la viscosidad,precipitación de las crioglobulinas y depósito de inmunocomplejos.

12/1/15 RECUENTO DE LEUCOCITOS(WBC)(PRÁCTICA XXVII)

FUNDAMENTO :
Contar el nº de leucocitos que hay en un mm3 de sangre .
MATERIAL :

• Microscopio.
• Pipeta de Thoma ,para glóbulos blancos(perla blanca ).
• Tubo de goma con la boquilla blanca.
• Gradilla.
• Cámara de Neubauer.
• Un cubre.
• Tubo de ensayo.
• Gasas.
• Papel de filtro.
• Bata.
• Guantes.

REACTIVOS:

Líquido de dilución es el de Turck,que produce lisis en los eritrocitos y en los leucocitos no los altera.

MUESTRA :

Sangre fresca anticoagulada con EDTA.

TÉCNICA :

1º Lleno la pipeta con la sangre hasta la señal de 1 y de liquido de dilución hasta 101,homogeinizo hasta 2 minutos ,desecho las dos primeras gotas y a continuación lleno la cámara de Neubauer.

2º La pongo en el microscopio.

3º Se cuentan cuatro cuadros grandes de las esquinas del retículo de la cámara.

4º Si los leucocitos se ven bien,se puede contar con el objetivo de 10 x.

LECTURA DE LOS RESULTADOS:

Cuento lo que da los cuatro cuadros grandes y lo divido por cuatro.Luego lo multiplico por 10 para saber los que hay en 1 mm3 de sangre.Y despues lo multiplico por 10 por que la pipeta la he llenado hasta la señal de 1 si se piensa que es anemia,(si la hubiese llenado  a 0,5 sería por 20 si sospecho que es policitemia).

 Aplico la fórmula :

WBC = L / 4  x  10  x  D

 WBC = 188 / 4 x 10  x 10 = 4700 leucocitos / mm3

                                             ____________________

WBC = Recuento de leucocitos por mm3 .

 L =47 por cada cuadro grande  x 4 = 188 Leucocitos.

47 X 10 = 470 por 1 mm3.

D =10 de dilución

INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS :

Nº de leucocitos normal  es de 5000 a 11000 por mm3.

Si WBC(leucocitos ) es bajo se produce leucopenias y si es alto leucocitosis.

HOJA DE TRABAJO :

1º ¿cuál es el líquido de dilución utilizadoen el WBC ? Turck .

2º ¿Para qué sirve el violeta de genciana que contiene el líquido de dilución ?Tiñe el núcleo de los leucocitos para verse mejor .

3º ¿Con qué objetivo se puede contar los leucocitos ? Con el de 10 x ,pero hemos utilizado el de 40 x .

4º Si la sangre se diluye a 1/10 y se cuentan 100 leucocitos en 2 cuadrados grandes periféricos ,¿cuál es el WBC obtenido ? 100/2 = 50  x 10 = 500  x 10 = 5000 leucocitos / mm3.

RESULTADOS OBTENIDOS :

El WBC  obtenido es normal(no hay ni leucopenia ,ni leucocitosis ).

RECUENTO DE PLAQUETAS CON HEMOCITÓMETRO(PRÁCTICAXXXV) 12 /1/15

MATERIAL:

• Un tubo de ensayo.
• Microscopio.
• Bata.
• Guantes 
• Papel de filtro.
• Tijeras.
• Gasas.
• Una cámara de recuento Neubabuer mejorada.
• Una pipeta de Thoma,para glóbulos rojos.
• Un tubo de goma con boquilla.
• Un cubre.
• Una placa Petri.
• una gradilla.

REACTIVOS:

• Agua destilada.
• Liquido de dilución.Laboratorios Spinreact(en el frigorífico). Este liquido rompe los hematíes,evita que se agreguen las plaquetas entre si y su adhesión a otros elementos ,facilita la visión de las plaquetas se ven refrigentes.

MUESTRA :

• Sangre venosa reciente con EDTA- K3.

TÉCNICA :

1º Ponemos liquido de Spinreact en el tubo de ensayo (1 ml para cada determinación ).

2º Con la pipeta de Thoma aspiro la sangre homogeinizada hasta la señal  de 1.

3º Limpio la sangre sobrante adherida al exterior de la pipeta.

4º Aspiro del liquido de dilución hasta la señal 101 de la pipeta.

5º Agito la pipeta con suaves movimientos durante 5 minutos. 

6ºDesecho la 5 primeras gotas de dilución que salen de la pipeta.

7º Cargo la cámara de recuento,con la dilución que queda en la pipeta.

8ºPongo la cámara de recuento dentro de una cámara Petri, que ya la tengo preparada está con un papel de filtro húmedo .

9º Dejo reposar la cámara de recuento durante 15 minutos,para que sedimente las plaquetas.

10º Pongo la cámara de recuento sobre el microscopio,enfocando uno de los reticulos de la cámara ,con el objetivo de 10 x.

11º Enfocar uno de los cuadrados grandes (a 40x )poniendo el condensador bajo.

12º Cuento las plaquetas que hay en ese cuadro grande.

LECTURA DE RESULTADOS :

Los trombocitos se ven con corpúsculos redondeados y ovalados,de pequeño tamaño y muy refringentes.
Para calcular el nº de plaquetas por mm3 de sangre ,aplico la fórmula :
PTL/mm3=P  x V  x D = P  x 1000

P=Nº de plaquetas por mm3 de sangre.
V= Corrección de volumen(10 )
D= Corrección de dilución(100)

PTL/mm3 = 23   x  10  x 100 = 23 x 1000= 23000 plaquetas /mm3

Si la cifra obtenida es muy reducida,se efectua una dilución menor de la muestra y se cuentan los trombocitos de varios cuadros grandes.
Y si es mayor la cifra ,se efectua una dilución mayor de la muestra.
Esto quiere decir que hay que confirmar un ajuste de los cálculos.

HOJA DE TRABAJO:
1º ¿Qué tipo de pipeta diluidora se utiliza en el recuento de plaquetas  ?De Thoma ,para glóbulos rojos.
2º ¿Qué funciones desempeña el liquido de dilución empleado ?Rompe los hematíes,evita la agregación de las plaquetas entre si y su adhesión a otros elementos y facilita la visión al hacerlas refringentes.
3º ¿Cuánto líquido de dilución se necesita para efectuar un ensayo ? 1ml.
4º ¿Con qué se puede preparar una cámara de húmeda ?Con una cámara Petri cerrada.
5º ¿Con qué objetivo se cuentan las plaquetas ?40 x
6º ¿Cómo se aprecian los trombocitos de este recuento ? Como corpúsculos redondeados y ovalados,de muy pequeño tamaño y muy refringentes.

RESULTADOS OBTENIDOS :

• Nº de plaquetas contadas en un cuadro grande : 23 .
• Nº de plaquetas por mm3 de sangre : 23000

VALORACIÓN DE LOS RESULTADOS :

(El nº de plaquetas normal por mm3 oscila entre 130000 y 400000 )

El  nº de plaquetas obtenido es :bajo

RECUENTO DE PLAQUETAS EN FROTIS SANGUINEAS -PRACTICA XXXIV- 2/ 1 / 15

OBJETIVO :  
El recuento de plaquetas (PTL)sirve para saber el nº de trombocitos que hay en un volumen de sangre (1 mm3).
Y para la morfología de los trombocitos.
MATERIAL:

• Microscopio.
• Papel.
• Boligrafo.
• Portas 
• Bata .
• Guantes.
• Papel de filtro.
• Una pipeta Pasteur.

REACTIVOS :

Panóptico rápido.

Aceite de inmersión.

MUESTRA:

Sangre venosa fresca con heparina.

DESARROLLO Y TÉCNICA :

1º Hago un frotis y lo tiño con el panóptico rápido.

2ºObservo el frotis con el aceite de inmersión a 100x.

3º Elijo una zona donde se ven bien las células y no están superpuestas.

4º Cuento las plaquetas de 10 campos microscópicos.

5º Calculo la media de los 10 campos.

LECTURA DE RESULTADOS :

PTL/mm3 =PLT/C . 20000

PLT/mm3=nº de plaquetas por mm3 de sangre.

PLT/C= Media del nº de plaquetas contadas en varios campos (10).

INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS :

En condiciones normales debe haber una plaqueta por cada 10 o 20 hematíes.

De 5 a 25 por campo.

Cuando el nº de plaquetas  por mm3 sangre es inferior a 130000 se dice que hay una trombocitopenia  o trombopenia o plaquetopenia y ,si es superior a 400000 hay una trombocitosis.

HOJA DE TRABAJO :

1º En condiciones normales,¿cuántas plaquetas por campo microscópico hay en una zona de un frotis sanguineo donde los eritrocitos no estan superpuestos ? De 5 a 25 trombocitos por campo.
 Resultados obtenidos :

• Número de plaquetas contadas en 10 campos microscópicos: 51+63+26+20+52+55+46+25+60+63
• Media del número de plaquetas contadas en 10 campos microscopicos (PTL/C) :516/10 = 51,6
• Númeo de plaquetas por mm3 de sangre (PTL/mm3):  51,6 . 20000 = 1032000PTL/mm3

 Valoración de los resultados

_______________________

El PTL/mm3 obtenido implica que el sujeto tiene :

Una trombocitosis.

ESTUDIO DE UN CONCENTRADO DE LEUCOCITOS (XXXII) 8/1/15

MATERIAL :

• Un tubo de centrifuga.
• Una centrifuga.
• Una pipeta Pasteur fina.
• 2 portas.
• Microscopio.
• Papel de filtro.
• Guantes .
• Bata.
• Micropipeta de 2ml.

REACTIVOS:

Panóptico rápido.

Aceite de inmersión.

MUESTRA :

• Sangre venosa anticoagulada con citrato sódico.(sangre en tubo de tapón negro ).

FUNDAMENTO:

Está indicada para :

• Obtención y estudio microscópico de células patológicas en una leucopenia.
• Obtención de células en una leucopenia para la realización de pruebas citóquimicas.
• Obtención de células para la búsqueda del corpúsculo de Barr.Éste es la condensación del material genético inactivado de un cromosoma X.
• Cuando centrifugamos la sangre anticoagulada a una velocidad y tiempo determinado ,se obtiene tres capas:
• En la capa inferior ,los eritrocitos.(color rojo).
• En la capa media,los leucocitos y plaquetas (de color blanco y escaso )llamada capa leucoplaquetaria o buffy coat.

TÉCNICA :

1º Mezclo la sangre y el anticoagulante(ya lo ha traido Valentin ).

2º Meto el tubo en la centrifuga a 3500 r.p.m. durante 20 minutos.

3º Saco el sobrenadante (plasma ) con la ayuda de la pipeta.

4ºCojo con  la micropipeta 2 ml de la capa leucoplaquetaria, con cuidado de no coger de la capa eritrocitaria.

5ºHago un frotis.

6º Tiño el frotis con el panóptico rápido.

7º Le añado una gota de aceite de inmersión.

OBSERVACIÓN:

Pongo el frotis en el microscopio ha 100x 

RESULTADOS: 

Se ven leucocitos de varios tipos y múltiples plaquetas.

HOJA DE TRABAJO:

1º ¿Cómo se llama a la condensación del material genético inactivado de un cromosoma X ? Corpúsculo de Barr.

2º ¿Qué otro nombre recibe la capa lucoplaquetaria ? Buffy coat.

3º Tras centrifugar la sangre ,¿en qué capa se sitúan los hematíes ?

En la capa leucoplaquetaria.

VALORACIÓN DE LOS RESULTADOS:

De los que más hay son de tres lobulaciones.

En la sangre estudiada:

No hay leucocitos con alteraciones.

íNDICE DE LOBULARIDAD(PRÁCTICA XXIX) 8/1/15

MATERIAL :

• Un microscopio.
• Un boligrafo.
• Un papel
• Frasco lavador.
• 2 portas.
• Vaso de precipitados.
• Una pipeta Pasteur.

MUESTRA:

• Sangre venosa heparízada fresca.

REACTIVOS:

Panóptico rápido.

DESARROLLO Y TÉCNICA :

1º Hago un frotis cuandoestá seco ,hago el panóptico rápido ,lavo el frotis y dejo secar en vertical.

2º Pongo el frotis el en microscopio y le añado una gota de aceite de inmersión y la observo con 100x.

3ºMiro los neutrófilos y cuento sus lobulaciones según Arneth.

4º Termino el recuento cuando haya visto 100 neutrófilos.

LECTURA DE LOS RESULTADOS :

Una vez contados los neutrófilos se cuenta las lobulaciones de cada uno y se aplica la fórmula  de IL :

IL = NL/NN

IL= Índice de lobularidad.

NL = Número de lóbulos contados.

NN = Número de neutrófilos observados(100).

INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS :

• La desviación a la izquierda puede indicar :neutrofilia o de neutropenia.Es típica de de muchas infecciones agudas (apendicitis,sepsis,...)
• La desviación a la derecha puede darse en varios procesos patólogicos(anemias megaloblásticas y también en la agonía).

HOJA DE TRABAJO :

1º¿Cuántos tipos de neutrófilos hay según Arneth ? 5 tipos.

2º¿Qué tipo de desviación hay si el IL es igual a 2,5 ? Está dentro de la normalidad (1,9 y 3).

3º ¿De qué enfermedades estípica la desviación a la izquierda con neutrofilia ? Neutrofilia o neutropenia.

Resultados obtenidos :

Tipo de neutrofilo                     Nº de neutrófilo que pertenece a ese tipo.

       I                                         2+1+1+2+1+1=8

     II                                          1+1+2=4 . 2 =8

     III                                        3+2+1+1+1+3+1+3+3+1 . 3 =66

     IV                                        2+1+1+2+2+1 .4= 36

      V                         

____________________________________________________________________

                                               118 lobulaciones------- Nº total de neutrófilos observados=100

Número total de lobulaciones cuantificadas : 118

Índice de lobularidad : 1, 18 %

                                                                                             IL = 118 / 100 = 1,18 %

Valoración de los resultados :

En la sangre estudiada :

No hay ningún tipo de desviación.