PRUEBA CRUZADA MAYOR (22/05 /15)

FUNDAMENTO
Para antes de la donación,se coge suero del receptor con los hematíes del donante ,primero en medio salino y después en medio albuminoso y por último frente a suero antiglobulina de Coombs.Con este último detectaremos los anticuerpos que hayan quedado fijados a la membrana.
Es importante respetar los tiempos de incubación para evitar errores en la técnica.
MATERIAL

• Tubo de hemólisis .
• Centrifuga.
• Baño de agua.
• Pipetas Pasteur.
• Gradilla.
• Reloj.
• Bata,guantes,papel de filtro.

REACTIVOS

• Suero salino.
• Albumina bovina al 30 %.
• Suero antiglobulina de Coombs.

MUESTRA

• Suero del receptor (A2)
• Hematíes del donante (suspensión de hematíes al 5% del grupo A1).

TÉCNICA

1. En un tubo pongo 1 gota de suspensión de hematíes del donante y 2 gotas de suero receptor.
2. Mezclo y dejo a temperatura ambiente 2-3 minutos.
3. Centrifugo 1700 r.p.m por 1 minuto .
4. Leo el resultado, si  aglutina o no, cuando despego el botón de sedimento,si aglutina es incompatible y si no aglutina es compatible.
5. Añado albumina bovina al tubo 3 gotas y mezclo bien.
6. Incubo a 37º C durante 30 minutos.
7. Centrifugo a 1700 r.p.m por 1 minuto.
   
8. Leo el resultado en el medio albuminoso,no aglutina.
9. Lavo 3 veces los hematíes con solución salina para eliminar los anticuerposque no se han fijado a los eritrocitos.Retiro bien el sobrenadante del último lavado.
10. Añado al tubo 1 gota de Coombs.Mezclo bien .
11. Centrifugo a 1000 r.p.m por 2 minutos.
12. Y leo el resultado.

LECTURA DE LOS RESULTADOS

La lectura se realiza resuspendiendo el botón hemático con suavidad después de cada centrifugación se mira en el microscopio a 40 x si se observa reacciones débiles (yo lo he mirado con el visualizador y no ha aglutinado en ninguna de las fases ).

INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS 

Si no aglutina en ninguno de los pasos indica que son compatibles y por lo tanto puede hacerse la transfusión de sangre.

La aglutinación en cualquiera de las fases indica incompatibilidad.

Si se observa hemolisis en cualquiera de los pasos es incompatible también.

HOJA DE TRABAJO

1. ¿Qué se enfrenta en la prueba cruzada mayor ? suero del receptor y hematíes del donante.
2. ¿Cuándo se debe realizar la prueba cruzada menor ?cuando se enfrenta el suero del donante con los hematíes del recetor.
3. ¿ Por qué  debemos realizar la prueba en medio salino y albumininoideo ? Para detectar todos los antígenos presentes.
4. ¿Qué pone de manifiesto el suero antiglobulina de Coombs ?Para detectar los anticuerpos que hayan quedados fijados a la membrana eritrocitaria.

RESULTADOS

RESULTADOS OBTENIDOS

• En el medio salino : no aglutina.
• En el medio albuminoso :no aglutina.
• En el suero antiglobulina :no aglutina.

VALORACIÓN DE LOS RESULTADOS

La sangre analizada es compatible.