DETERMINACIÓN DE UN Du(20 /05/15)

FUNDAMENTO

El Du es un antígeno débil que no se manifiesta en las pruebas normales de determinación del Rh.Para ello cogemos hematíes problema con un suero que contiene anticuerpos D y después lo enfrentamos al suero de Coombs .Si hay antígeno Du en la superficie de los eritrocitos ,se produce la unión a los anticueros anti-D a sus receptores de membrana y en la segunda fase darán aglutinación en presencia del suero antiglobulina humana.Es una prueba de Coombs indirecta.

MATERIAL

• Tubo de centrifuga .
• Centrifuga.
• 3 Pipetas Pasteur.
• Vaso de precipitado.
• Gradilla.
• Reloj.
• Baño de agua.
• Bata,guantes y papel de filtro.

REACTIVOS

• Suero anti-D.
• Suero antiglogulina humana de conejo(suero de Coombs,frasco verde).
• Suero fisiológico.

MUESTRA

Suspensión de hematíes al 5 % del grupo O.

TÉCNICA 

• En un tubo de hemolisis pongo una gota de suero anti-D y una gota de suspensión de hematíes al 5 % del grupo O.
• Mezclo suavemente e incubo el tubo a 37ºC durante 30-45 minutos.
• Después lavo los hematíes con suero fisiológico tres veces seguidas a 1000 r.p.m. por 1 minuto.Quito el sobrenadante completamente después del último lavado.
• Le añado sobre el sedimento 1 gota de Coombs y mezclo.
• Centrifugo a 1000 r.p.m por 1 minuto.

LECTURA DE RESULTADOS

Observo si ha aglutinado despegando el coagulo con suaves golpecitos y lo observo sobre el visualizador.

INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS

Si existe aglutinación ,el resultado es positivo.Indica que en la membrana de los hematíes hay antígeno Du,y se clasifica la sangre como Rh ositivo variante Du.

Si no aglutina se clasifica la sangre como Rh negativo.

Para evitar falsos positivos ,debemos realizar una prueba de Coombs directa con los hematíes problema.Eso nos servirá como control negativo.

HOJA DE TRABAJO

1. ¿Qué contiene el suero de Coombs ?suero antiglobulina humana de conejo.
2. ¿Qué se detecta con la prueba directa ?un falso positivo.
3. ¿Qué podemos detectar con la prueba indirecta?un Rh + Du (débil).
4. ¿Qué buscamos en la sangre del paciente ?antígeno Du.
5. ¿Qué ocurre si el control es positivo ? que la membrana de los hematíes del aciente hay antígeno Du.

RESULTADO OBTENIDO

NO AGLUTINA,POR LO TANTO LA SANGRE ES Rh NEGATIVO