Intento poner de manifiesto la presencia del antígeno D en la superficie de loshematíes mediante su enfrentamiento a un suero anti -D.
MATERIAL :
- Tubos de centrifuga.
- Rotulador.
- Gradilla.
- Pipetas Pasteur (de plástico ).
- Centrifuga.
- Guantes ,bata ,papel de filtro.
REACTIVOS:
Sangre de bolsa preparada en suspensión al 5 %
TÉCNICA :
- Cojo 2 tubos de centrifuga y la añado 0,5 ml de sangre de la bolsa problema y le añado suero salino hasta la mitad del tubo para igualarlos y lo meto en la centrifuga a 2000 r.p.m por 4 minutos.Le retiro el sobrenadante y repito la misma operacion de lavado 2 veces más.
- El sedimento que me queda cojo 5 gotas y las pongo en otro tubo y le añado 5 ml de suero salino,la homogeneizo y esta es la suspensión que necesito para analizar.
- Rotulo dos tubos de centrifuga más pequeños uno con la letra D y el otro con la letra A.
- A cada tubo le añado 1 gota de la suspensión anterior y una gota de suero anti -D en el tubo D y 1 gota de albúmina al tubo A, mezclo suavemente.
- Y centrifugo por 1 minuto a 1000 r.p.m .
LECTURA DE RESULTADOS :
Con el pulpejo del dedo anular y medio golpeo el fondo del tubo suavemente para despegar el coagulo.
Se considera aglutinación positiva si se forman grumos rojos en un líquido claro y si no se aglutina los hematiés decimos que es negativa.
El tubo de la albúmina es un control negativo y debe dar siempre ausencia de aglutinación.Si no es así el resultado la prueba no es válida .
INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS .
Si el tubo D aglutina y el tubo A no, decimos que el paciente es Rh positivo.
Si no se produce aglutinación en ninguno de los tubos tengo que incubar ambos a 37ºC durante media hora.Y luego centrifugar a 1000 r.p.m por 1 minuto y observo de nuevo si hay aglutinación o no .
Si persiste la negatividad comprobaré que el paciente no posee un D u (D débil )mediante una prueba de Coombs indirecta.
Si después de todo estos pasos el resultado es la no aglutinación ,informaremos que el paciente es Rh negativo.
HOJA DE TRABAJO
- ¿Por qué utilizamos el control de albúmina ?para saber si la prueba es válida.
- ¿Qué ocurre si no aparece aglutinación en el tubo D?que no es Rh positivo
- ¿Qué decimos detectar mediante un Coombs indirecto ?que el paciente no posee un Du (débil ).
- ¿Como se prepara la muestra problema ?Cojo 2 tubos de centrifuga y la añado 0,5 ml de sangre de la bolsa problema y le añado suero salino hasta la mitad del tubo para igualarlos y lo meto en la centrifuga a 2000 r.p.m por 4 minutos.Le retiro el sobrenadante y repito la misma operación de lavado 2 veces más.El sedimento que me queda cojo 5 gotas y las pongo en otro tubo y le añado 5 ml de suero salino,la homogeneizo y esta es la suspensión que necesito para analizar.
RESULTADOS OBTENIDOS
Aglutinación
Sección S +
Sección A -
VALORACIÓN DE LOS RESULTADOS
La sangre analizada es : Rh negativo
No hay comentarios:
Publicar un comentario