MATERIAL:
- Microscopio.
- Bata.
- Guantes
- Papel de filtro liso.
- Baño de agua.
- 3 tubos de ensayo.
- Gradilla.
- 3 pipetas Pasteur.
- Papel parafilm.
- 2 portas.
REACTIVOS:
Azul cresil brillante en liquido.
Aceite de inmersión.
MUESTRA:
Sangre anticoagulada con EDTA
Sangre anticoagulada con EDTA
FUNDAMENTO Y TÉCNICA :
Con está técnica podemos observar reticulocitos teñidos en el interior de la célula de color azul intenso y según el grado de maduración presentará un reticulocito distinto,los más jovenes como ovillos densos y los más maduros gránulos escasos.Se clasifican en cuatro grupos : grado I célula joven ,grado II,grado III y grado IV célula vieja.
En una tinción supravital ,se hace mientras las células están vivas.
Cogemos tres gotas de sangre anticoagulada y la depositamos en un tubo de ensayo y tres gotas del colorante y homogeneizamos.
Lo tapamos con papel parafilm y lo meto en el baño de agua que está a 37 grados centigrados durante cinco minutos.
Pasado el tiempo volvemos a homegeinizar y tomamos una gota y hago un frotis sobre el porta.dejo secar al aire.Hacer dos frotis.
Pongo el porta el el microscopio con el objetivo de 100 x y la añado una gota de aceite de inmersión.
OBSERVACIÖN:
Los hematíes se han teñido de color verde amarillento y los reticulocitos se aprecian tres en un campo.
Se deben contar 2000 hematíes en total y se calcula así:
%reticulocitos = nº de reticulocitos/nºde hematíes contados · 100
Hacer recuento de ambos frotis,de manera que la diferencia de ambos sea igual o menor a 5 reticulocitos.
HOJA DE TRABAJO:
1º¿Qué son los reticulocitos ?Son eritrocitos inmaduros que contienen ,un retículo formado por restos de ARN(ribosomas ),mitocondrias y otros órganulos celulares .
2º¿Qué tipo de tinción estamos utilizando ?Azul cresil brillante .
3º¿Por qué hacemos la correpción del porcentaje de reticulocitos? Se hace en base al valor hematocrito del pacienteSi hay muchos reticulocitos puede indicar cáncer o una anemia falta de hemoglobina por falta de oxigeno entonces se producen más eritrocitos.
4º ¿Qué nos expresa el IPR? Nos da un valor numérico de la estimulación hematopoyética por encima de la actividad de la linea base normal.Mayor de 3 nos indica aumento de la actividad eritropoyética medular,mientras que un IPR menor de dos indica una escasa actividad eritropoyética.
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