FÓRMULA LEUCOCITARIA (PRACTICA XXVIII)1/12 /2014.

MATERIAL:

• Microscopio.
• Bata .
• Guantes.
• Registrador automático de células también se puede usar papel y lápiz.
• 2 portas.
• Un capilar heparinizado.
• Una lanceta.
• 1 gasa.
• Alcohol.
• Papel de filtro liso.

MUESTRA:

Sangre fresca .

REACTIVO:

 Aceite de inmersión.

TÉCNICA Y DESARROLLO:

1º hacemos un frotis con el capilar de sangre dejamos secar.

2º y hacemos un papnotico rápido.

3º Dejamos secar y le añadimos una gota de aceite de inmersión.

4ºPonemos en el microscopio la extensión con el condensador alto y el diafragma abierto,enfoco con el objetivo de 10 x .

5º  Observamos una zona donde se vean los hematies y empezams a anotar en la máquina registradora ,vamos moviendo el frotis en forma de zig zag ara no repetir lo que voy anotando hasta llegar a 100 leucocitos entonces la máquina pita y le doy al tanto por ciento y me da el resultado de la muestra.

HOJA DE TRABAJO :

1º ¿Con qué objetivo se observan los leucocitos cuando se determina una fórmula leucocitaria ?10 x

2º ¿Cómo es el recorrido que se describe en la observación leucocitaria ?almenas

3º ¿Cuándo se han de observar al menos 200 leucocitos ?cuando se encuentran un mayor número de linfocitos que de neutrófilos.

4º Si de 100 leucocitos observamos,20 son linfocitos y el WBC es igual a 7000 leucocitos /mm3 de sangre,¿cuál es el número de linfofitos que hay en 1 mm3 de sangre ?     Nº TL = WBC · %TL  / 100

Nº TL= 7000  x 20  / 100 = 1400 linfofitos /1mm 3 de sangre.

RESULTADOS OBTENIDOS :

TIPO DE LEUCOCITOS                  NÚMERO ENCONTRAD0

____________________________________________________________

Neutrófilos segmentados                         18 %

Neutrófilos en cayado                              19%

Eosinófilos                                               0 %

Basófilos                                                  3%

Monocitos                                               3 %

Linfofitos                                                 54 %

DETENCCIÓN DE CUERPOS DE HEINZ(PRACTICA XXI) 27/11/2014

MATERIAL:

• Microscopio.
• Bata 
• Guantes 
• Papel de filtro liso.
• 3 pipetas Pasteur.
• Un baño de Agua.
•  2portas .
• 3 tubos de ensayo.

REACTIVOS:

Colorante Cristal Violeta ya preparado con anterioridad.

Aceite de inmersión.

MUESTRA:

Sangre fresca anticoagulada del Profesor Valentin.

TÉCNICA:

1ºPongo en un tubo de ensayo volumenes iguales de cristal violeta y sangre ,unas cinco gotas de la pipeta Pasteur de cada componente ,homogeneizamos y tapamos con papel parafilm .

2º Meto el tubo en el baño por 5 minutos a 37 ºC.

3º Saco el tubo homegeneizo .

4º Saco una gota y hago una extensión ,dejo secar.

5ºPongo la muestra en el microscopio con el objetivo de 100x y le añado una gota de aceite de inmersión.

6º Observo la muestra.

RESULTADO :

La extensión se aprecia restos o impurezas del tinte por lo cual no se ve bien ,repetimos otra vez el mismo proceso pero con el reactivo diluido al 50 % con suero fisiologico y filtrado .

Y se puede observar la extensión un poco más clara pero no puede distinguir granulaciones de color púrpura más bien parece como si observaras una piedra de granito por la forma que tiene.

HOJA DE TRABAJO :

1º ¿Cuál es el colorante usado para teñir los cuerpos de Heinz ?

Solución Cristal Violeta.

2º¿De qué color son los cuerpos de Heinz teñidos ? Púrpuras.

3º¿Dónde se localizan los cuerpos de Heinz ?En la periferia de los hematíes.

RESULTADOS OBTENIDOS :

No se han encontrado cuerpos de Heinz ,se veía granulaciones del colorante por estar mal diluido.

VALORACIÓN :

No tiene una Hb inestable ,porque no está enfermo Valentin .
Los cuerpos de Heinz salen por enfermedades congénitas o por medicamentos como por ejemplo: sulfamidas,anagesicos,...

CONTAJE DE RETICULOCITOS(Practica XVI)27/11/2014

MATERIAL:

• Microscopio.
• Bata.
• Guantes 
• Papel de filtro liso.                 
• Baño de agua.
• 3 tubos de ensayo.
• Gradilla.                                         
• 3 pipetas Pasteur.
• Papel parafilm.
• 2 portas.

REACTIVOS:

Azul cresil brillante en liquido.

Aceite de inmersión.

MUESTRA:
Sangre anticoagulada con EDTA

FUNDAMENTO Y TÉCNICA :

Con está técnica podemos observar reticulocitos teñidos en el interior de la célula de color azul intenso y según el grado de maduración presentará un reticulocito distinto,los más jovenes como ovillos densos y los más maduros gránulos escasos.Se clasifican en cuatro grupos : grado I célula joven ,grado II,grado III y grado IV célula vieja.

En una tinción supravital ,se hace mientras las células están vivas.

Cogemos tres gotas de sangre anticoagulada y la depositamos en un tubo de ensayo y tres gotas del colorante y homogeneizamos.

Lo tapamos con papel parafilm y lo meto en el baño de agua que está a 37 grados centigrados durante cinco minutos.

Pasado el tiempo volvemos a homegeinizar y tomamos una gota y hago un frotis sobre el porta.dejo secar al aire.Hacer dos frotis.

Pongo el porta el el microscopio con el objetivo de 100 x  y la añado una gota de aceite de inmersión.

OBSERVACIÖN:

Los hematíes se han teñido de color verde amarillento y los reticulocitos se aprecian tres en un campo.

Se deben contar 2000 hematíes en total y se calcula así:

%reticulocitos = nº de reticulocitos/nºde hematíes contados · 100

Hacer recuento de ambos frotis,de manera que la diferencia de ambos sea igual o menor a 5 reticulocitos.

El resultado final es la media de los dos porcentajes obtenidos.

HOJA DE TRABAJO:

1º¿Qué son los reticulocitos ?Son eritrocitos inmaduros que contienen ,un retículo formado por restos de ARN(ribosomas ),mitocondrias y otros órganulos celulares .

2º¿Qué tipo de tinción estamos utilizando ?Azul cresil brillante .

3º¿Por qué hacemos la correpción del porcentaje de reticulocitos? Se hace en base al valor hematocrito del pacienteSi hay muchos reticulocitos puede indicar cáncer o una anemia falta de hemoglobina por falta de oxigeno entonces se producen más eritrocitos.

4º ¿Qué nos expresa el IPR? Nos da un valor numérico de la estimulación hematopoyética por encima de la actividad de la linea base normal.Mayor de 3 nos indica aumento de la actividad eritropoyética medular,mientras que un IPR menor de dos indica una escasa actividad eritropoyética.

RECUENTOS CELULARES.Tema 5 del libro(EJERCICIOS DE AUTOEVALUACIÓN) 24/11/2014

1º En una cámara de recuento ¿cuánto están sobreelevadas las dos bandas laterales con respecto a la central donde está grabado el retículo?
a)0,1mm

2º¿Cómo debe ser el liquido de dilución utilizado para el recuento de hematíes?

b) Isotónico.

3º En algunos recuentos electrónicos ,a la menor dilución de la muestra de sangre se le añaden varias gotas de un reactivo que puede contener cianuro y un detergente no ionico.Este reactivo debe actuar durante unos minutos y produce :
a) una lisis de de los hematíes.

4º ¿En qué componente de un contador electrónico se cuentan ,realmente,las células sanguíneas ?

a) Dispositivo de medida.

5º ¿Cuál no es un método electrónico de recuento celular ?
b) Método de la reflexión
de la luz ultravioleta.

6º ¿Qué enzima se cuantifica,en algunos autoanalizadores hematólogicos,para clasificar a los leucocitos ?

d)Peroxidasa.

7º Cuando una cámara de recuento ,tipo Neubauer mejorada,está montada,¿qué volumen de sangre diluida hay a nivel de cinco cuados medianos contenidos en el cuadro central del tetículocito ?
 d) 0,02 mm3

RECUENTO DE HEMATÍES(PRACTICA XIII)

21/11/2014

MATERIAL :

• Una pipeta diluidora de Thoma (bolita roja ),para recuento de glóbulos rojos .
• Un tubo de goma con boquilla ,adaptable a la pipeta diluidora.
• Un cubre.
• Microscopio.
• Guantes .
• Bata.
• papel de filtro liso.
• Una cámara de recuento tipo Neubauer mejorado.

REACTIVOS:
Liquido de dilución, Hayem.
Si contiene precipitados ,antes de usarlo debe ser filtrado.

 MUESTRA:
Sangre venosa anticoagulada con EDTA.

TÉCNICA Y DESARROLLO :
1º Cojo la cámara y le paso el dedo mojado en agua por las dos  bandas laterales de la cámara y a continuación le pongo encima el cubre sobre la cámara para que se adhiera a ella.
2ºCojo la pipeta Thoma y aspiro hasta la señal de 1 (si se piensa que tiene anemia ),si me sobrepaso un poco del enrase ,lo limpio con la ayuda de un algodón tocando la punta de la pipeta .
3ºLimpio el exterior de la pipeta con un algodón y sin descender de uno aspiro el diluyente de Hayen hasta la señal de 101.
4ºDesengancho cuidadosamente la g el tubo de goma de la pipeta y lo dejo homogeneizar la mezcla  durante tres minutos para ello se sujeta los dos extremos de la pipeta y se mueve suavemente hacia arriba y hacia abajo.
5ºDesecho las tres primeras gotas y la siguiente gota la deposito entre la cámara y el cubre ,dejándola que penetre por capilaridad ,evitando que se forme burbujas o que rebose la sangre diluida por los bordes del cubre.
6ºLo dejo reposar unos minutos para que las células sedimenten.
7º Pongo la cámara en el microscopio con el objetivo de 40x y con el condensador a baja altura y mirar que la distribución de los hematies es homogénea.
8º Cuento los hematíes presentes en 80 cuadros pequeños del cuadro central.Es decir ,contando los hematíes que hay en los cuatro cuadrados medianos de las esquinas y en el centro .

RESULTADOS :


Se calcula con la siguiente formula :

RCB= H x 5 x10 x d.

RCB=recuento de hematíes (nº de hematíes por mm3 de sangre)

H= hematíes contados en cinco cuadros medianos .

D = factor de dilución (100 ) El margen de error de esta técnica es de más o menos el 20 %

INTERPRETACIÓN : 

Si disminuye el recuento de hematíes  es señal de anemia.

Se considera normal en los hombres 4,5 y 6 millones /mm 3 y en las mujeres entre 4 y los 5,5 millones /mm3

HOJA DE TRABAJO :

1º¿Qué se debe hacer si el liquido de HAYEM contiene precipitados ?Si los tiene hay que filtrarlos.

2º¿Cuál es el volumen de sangre diluida que hay sobre cada uno de los cuadrados pequeños donde se han contado los hematíes ?

3º¿Cuál es el volumen de sangre diluida que hay sobre cada uno de los cuadros medianos donde se han contado los hematíes ?

4º ¿Cuál es es volumen de sangre diluida que hay sobre el cuadro central ?

5ºSi la pipeta Thomase enrasa con sangre hasta la señal de 1,¿cual es la dilución `posteriormente obtenida ?100

6ºSi la sangre se diluye a 1/200 y se cuentan 450 hematíes en 5 cuadros medianos ¿cuál es el RBC obtenido ? RBC= 450 x 5 x 10 .1/200 = 4500000 hematíes.

RESULTADOS OBTENIDOS :

Hematíes contados en 5 cuadros medianos :  450 

Factor de dilución :    200

RBC =4,5 millones /mm 3

VALORACIÓN DE LOS RESULTADOS :

Sexo de la persona a la que pertenece la sangre :

Femenino

El RBC obtenido es :  Normal